| １． |
授業の概要（ねらい）・ディプロマポリシーとの関連 |
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以下の内容を学びます。
(1) DNAの連結と形質転換：プラスミドベクターの作製、lacZ DNAの連結、大腸菌の形質転換
(2) DNAの精製：プラスミドDNAの抽出と精製
(3) 制限地図の作成：制限酵素切断部位の同定、アガロースゲル電気泳動
(4) 試験管内でのDNA増幅：PCR法による lacZ DNAの増幅
(5) 遺伝子発現の調節：β-ガラクトシダーゼの誘導合成、呈色反応による酵素活性の測定
この実験では、DP2、DP3に関する知識、技法、態度を修得します。
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| ２． |
授業の到達目標 |
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大腸菌プラスミドを用いたDNA組換え実験操作の基本技術を習得できます。
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| ３． |
成績評価の方法および基準・フィードバック方法 |
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試験は行いません。レポートの結果が60％以上を合格とします。 レポートは解説をつけて返却します。
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| ４． |
教科書・参考書 |
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あらかじめ、実験テキストを配付します。
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| ５． |
準備学修の内容・必要な時間 |
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事前に実験テキストをよく読んでおいてください。
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| ６． |
その他履修上の注意事項 |
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白衣、名札、A4判レポート用紙、定規を各自で用意してください。
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| ７． |
授業内容 |
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１回目 組換え体プラスミドDNAの作製と形質転換
１．制限酵素によるプラスミドDNAの切断
２．LacZ DNAの連結
３．大腸菌の形質転換
２回目 アガロースゲル電気泳動によるDNA切断反応の検証
３回目 アルカリ法によるプラスミドDNAの抽出と精製
４回目 制限地図の作成
１．制限酵素によるプラスミドDNAの切断
２．アガロースゲル電気泳動による酵素切断部位の同定
５回目 ラクトースオペロンの発現調節1
IPTG による lacZ 遺伝子の発現誘導
６回目 ラクトースオペロンの発現調節2
呈色反応によるβ-ガラクトシダーゼ活性の測定
７回目 PCR法による lacZ DNAの増幅、総合討論
８回目 レポート作成
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